1. 建立基因轉殖動物核心實驗室做為提供技術服務與資訊交流平台。
2. 利用基因操控的方法建立現有疾病動物模式,特別針對國人特有的疾病,供生物醫藥學界研究使用。
3. 建立分子診斷學及病理形態學的方法,以利確定動物病徵,期能了解致病之相關機制。
4. 開發新技術使動物模式的建立更容易。
5. 結合生物技術教育及生命倫理學觀念的推廣,以提升國人尊重生命及導正濫用科技的迷思。
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中文摘要
在分子生物學快速發展之下,帶動相關研究蓬勃發展,DNA定序成為顯學,1990年代至今數種生物的遺傳基因序列陸續被解碼,即便是人類的基因序列也不再是秘密,然而究竟人類帶有多少功能基因至今仍是眾說紛云,因此下個階段的工程便是逐步解開各個功能基因之謎。

小鼠長期以來即為研究人類疾病最佳動物模式,2001年美國赛洛因公司(Celera Genomics)已將小鼠129的兩個品系之基因序列解碼完成提供付費使用,2003年小鼠B6的基因序列也被Mouse Genomic DNA Sequencing Consortium解碼完成,預估約有4萬個功能基因,隨著基因操控技術的成熟,製造出各種帶不同基因缺陷的模式動物供生物醫學研究已非難事。

本實驗室藉由數年來與產官學界密切合作,已建立起具競爭力的基因轉殖、種源保存、實驗鼠淨化等技術,未來將以此為基礎成立服務平台提供技術與資訊,支援臺灣大學致力基礎科學研究,同時配合醫學院建立臺灣特有的疾病之動物模式與後續之致病機制及治療方法的開發。

Abstract
The mouse has been one of the best animal models for studying human diseases in various respects. Along with the progress of the molecular biology, mechanisms leading to human diseases have been gradually unveiled, and those genes involved in the mechanisms are in the path of being identified. Since 2001, the genomic DNA sequences of several mouse strains have been completed. It is estimated that there are about 40,000 functional genes. In order to understand those genes related to human diseases and the novel functional genes, the genetic manipulated mice including transgenic mice and knockout mice have been generated to facilitate the purpose. This transgenic core has been collaborated with industrial and research institutes for years, and has built up competitive know-how for transgenic mice, embryo cryopreservation, and pathogen free rederivation. In the future, this core will commit itself to generating mouse models to facilitate the understanding of gene functions, the mechanisms of human diseases, and the development of the therapy, especially for the indigenous cancers and infectious diseases of Taiwan.

目標特點

1.)
The mouse core laboratory will generate the models for investigating mechanism leading to human cancers and metastasis, and infectious diseases that each component project proposes to study, and will support functional genomics studies on novel gene functions. Novel genes identified in any of the joined subprojects will be able to use this core facility to study the functions of the genes.
2.)
The laboratory will help each subproject to characterize, breed and maintain established mouse models for related studies, and will integrate into the biomedical community worldwide and on this island by providing technical advises and consultations.
3.)
The principle investigator and co-investigators will promote educations of related advanced technologies through the organizations of workshops and symposia.
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服務項目
1.原核胚顯微注射(Pronuclei Microinjection):

本實驗室以FVB/NJC57BL/6J純種品系小鼠提供原核胚顯微注射,藉由原核胚顯微注射,提供至少三隻攜帶轉殖DNA片段的成品鼠供研究人員使用。研究人員若有多於三隻轉殖鼠的要求,當視為新建構基因重新計費。若因轉殖基因造成胚胎死亡或無法產出約定數目之轉殖鼠,將再重做一次之後,退還此轉殖基因,酌收一次原核胚顯微注射與胚胎移殖的費用。轉殖小鼠在出生後一至二個星期後,剪尾供委託人做基因鑑定(genotyping)分析,委託人必須於收到檢體一個星期內回覆本實驗室,如有延遲當收取額外代養費。

 

2.胚幹細胞基因標的(ES Cell Gene Targeting):

本實驗室使用129X1/SvJ來源的胚幹細胞,在取得構築基因後,經由電穿孔 (electroporation)後,再進行篩選取得至少100個增殖的獨立細胞群(cell clones)後,分離DNA交由委託人基因鑑定(genotyping)

 

3.囊胚顯微注射(Blastocyst Microinjection)

經基因標的129來源的胚幹細胞(129-derivative ES cells),依基因鑑定結果進行囊胚的顯微注射,打入C57BL/6J的囊胚(blastocyst)以取得嵌合鼠(chimera)。一次顯微注射限定單一個細胞株號碼。依毛色70% ES chimerism的標準,至少交付二隻嵌合鼠。

 

4.胚胎冷凍(Embryo Cryopreservation)及解凍復育(Recovery)

每一個委託之小鼠品系或基因轉殖鼠,需先經本中心健康監測,無感染Mycoplasma Spp.LCM virus等垂直感染的病原為限。需至少提供2-4個月齡之公鼠5隻及4-8週齡之母鼠20隻,本實驗室以250個胚胎的儲存量分存兩桶,確保成功保種。若受品系影響,無法得到足量之胚胎,本實驗室得要求增加公母鼠數量,直至足量胚胎冷凍保存為止。第二年以後每年收取液態氮材料費1500元。胚胎解凍復育,至少交付四隻小鼠。以上兩項委託因品系不同而困難度有異,若無法達成目標,委託人不得有異議。

 

5.小鼠淨化復育(Pathogen Free Rederivation)

小鼠淨化復育由研究人員提供至少提供2-4個月齡之公鼠5隻及4-8週齡之母鼠10隻,進行帝王切開術(C-section)或胚胎移殖(embryo transfer)復育,至少交付三隻小鼠。但委託之小鼠若須以帝王切開術復育,須先經本中心健康監測,無感染Mycoplasma Spp.或 LCM virus等垂直感染的病原為限。

 

6.篩選基因剔除胚胎幹細胞株(screening of targeted ES cells)

核心實驗室接受委託人鑑定基因標的ES細胞株是否為基因剔除株,以250個細胞株為收費基準。鑑定的技術包括PCRSouthern blotting。

 

7.利用Cre-loxP基因標的胚胎幹細胞(Cre-loxP based gene targeting of ES cell)

核心實驗室接受組織特異基因剔除的服務申請,在取得研究基因後,經由電穿孔(electroporation)將基因轉染入細胞,再進行篩選取得至少100個獨立細胞群後,交由委託人鑑定。

 

8.囊胚的顯微注射{購自其他機構之幹細胞}與胚移殖(Blastocyst Microinjection and implantation of commercially derived ES cell clones)

本項服務接受購自其他機構胚胎幹細胞株之幹細胞,利用顯微注射打入C57BL/6的囊胚(blastocyst),以取得嵌合鼠。一次顯微注射限定單一個細胞株號碼,交付二隻嵌合鼠。購自其他機構之幹細胞所得嵌合鼠毛色不限。

 


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